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阿米舒必利-雞卵清白蛋白偶聯物的免疫活性檢測方法的原理是什么?

2024-10-09 [118]

阿米舒必利-雞卵清白蛋白偶聯物|Amisulpride-Ovalbumin Conjugate(Amisulpride-OVA Conjugate)

阿米舒必利 - 雞卵清白蛋白偶聯物的免疫活性檢測方法通常采用免疫分析技術,如酶聯免疫吸附測定(ELISA)等,其原理如下:

 

一、基本原理

抗原抗體特異性結合

阿米舒必利 - 雞卵清白蛋白偶聯物作為一種抗原,能夠與樣本中特異性的抗體發生結合。這種結合是高度特異性的,即只有針對阿米舒必利或偶聯物上特定表位的抗體才能與之結合。

例如,在檢測動物血清中是否存在針對阿米舒必利的抗體時,若血清中含有該抗體,就會與偶聯物上的阿米舒必利或雞卵清白蛋白上因偶聯而產生的新表位發生特異性結合。

檢測系統產生可檢測信號

通過與特定的檢測系統結合,產生可檢測的信號,從而實現對結合反應的定量或定性分析。

 

二、以酶聯免疫吸附測定(ELISA)為例

包被

將阿米舒必利 - 雞卵清白蛋白偶聯物包被在固相載體(如酶標板)表面。通常通過物理吸附或化學結合的方式,使偶聯物牢固地固定在載體上。

封閉

加入封閉液,封閉載體表面未結合偶聯物的位點,以減少非特異性結合。常用的封閉液有牛血清白蛋白、脫脂奶粉等蛋白質溶液。

加樣

加入待檢測的樣本(如血清、血漿等)。如果樣本中含有針對阿米舒必利或偶聯物的抗體,這些抗體就會與包被在載體上的偶聯物結合。

洗滌

用洗滌液洗去未結合的物質,包括未結合的抗體和其他雜質,以降低背景信號,提高檢測的特異性。

加酶標二抗

加入與一抗(樣本中的抗體)特異性結合的酶標二抗。二抗通常是用酶(如辣根過氧化物酶或堿性磷酸酶)標記的,能夠與一抗結合,并且攜帶酶分子。

洗滌

再次洗滌,去除未結合的酶標二抗。

加底物

加入酶的底物。根據酶的種類不同,底物會在酶的催化下發生顏色變化、產生發光等信號。

檢測信號

使用酶標儀等設備檢測反應產生的信號強度。信號強度與樣本中抗體的含量成正比,通過與標準曲線比較,可以確定樣本中抗體的濃度,從而間接反映阿米舒必利 - 雞卵清白蛋白偶聯物的免疫活性。

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